iPLEX Pro® NIPT Testing

Sàng lọc Agena NIPT 3 bước với nhiều ưu thế:
- Giá thành thấp.
- Giảm độ phức tạp của quy trình.
- Thời gian trả kết quả nhanh.
- Sàng lọc tất cả các nguy cơ chỉ trong 1 xét nghiệm.
- Tổng thời gian trả kết quả cực nhanh - 2 ngày.
- Xét nghiệm T21/18/13.

+ Hạn chế độ nhạy methyl hóa nhờ chọn lọc enzyme phân lập theo từng vùng.
+ Các xét nghiệm được thiết kế riêng cho DNA của thai nhi có các vùng Hyper-methylated (siêu methyl hóa) hơn so với DNA của mẹ.
+ Sau quá trình Methyl hóa, phản ứng PCR cạnh tranh được thực hiện. Đường tuyến tính của kết quả được phân tích bởi phần mềm thuật toán. Bên trên là Trisomy khối lượng phân tử cao, bên dưới là Trisomyvới khối lượng phân tử thấp.

Kiểm soát chất lượng
- Dữ liệu: Đo, kiểm soát tốc độ mở rộng và tín hiệu nhiễu để đảm bảo thiết bị hoạt động tốt.
- Qúa trình thực hiện: kiểm soát tất cả các bước phản ứng.
- Quản lí chất lượng mẫu đầu vào:
Lượng mẫu đầu vào, cfDNA tổng trong xét nghiệm luôn được tính toán chi tiết bằng thuật toán và là tiền đề để đưa ra các đánh giá chính xác về các chỉ số của thai nhi.
- Các mẫu thai được đưa vào phân tích phải có các chỉ số plasma lớn hơn 3% (điều kiện chọn lọc mẫu đủ tiêu chuẩn).
CÁC NGHIÊN CỨU KHẢ THI ĐÃ THỰC HIỆN
- Mẫu CfDNA được tách chiết từ 2,8 ml plasma nhờ kít tách chiết cfDNA của Qiagen.
- Các mẫu có và không có phân tích dữ liệu lâm sàng. Cụ thể:
+ 79 mẫu - từ dân số nguy cơ thấp (không có dữ liệu lâm sàng để so sánh)
+ 340 mẫu - các mẫu được đặc trưng là Euploid sử dụng NIPT dựa trên NGS.
+ 29 mẫu - các mẫu được đặc trưng là T21 sử dụng NIPT dựa trên NGS.
- Được phân tích bằng thuật toán và trình báo cáo phần mềm iPLEX Pro NIPT T21.
KẾT QUẢ PHÂN TÍCH
TRÊN 448 MẪU
- Độ nhạy: > 99% (29/29 T21).
- Độ đặc hiệu: 96,7% (405/419 euploid).
- 18/459 (3,9%) mẫu QC fail; do lượng plasma input thấp
- Xét nghiệm và thuật toán được tối ưu hóa để giảm tỷ lệ fail.

CÁC NGHIÊN CỨU KHẢ THI ĐÃ THỰC HIỆN
- Mẫu cfDNA được tách chiết từ 2 mL plasma bằng kit tách tiết của Qiagen.
- Sử dụng Agena’s iPLEX Pro NIPT T21 Panel (2 plates) để phân tích các mẫu:
+ 172 - mẫu euploid
+ 10 - mẫu dương tính T21
+ 6 - mẫu euploid từ plasma gộp
- Được phân tích bằng thuật toán và trình báo cáo phần mềm iPLEX Pro NIPT T21.

KẾT QUẢ (190 mẫu)
- Độ nhạy:> 99% (10/10 T21)
- Độ đặc hiệu: 96,5% (168/174 euploid)
- 6 mẫu (3%) QC fail do lượng cfDNA đầu vào thấp.
==> yếu tố lượng mẫu đầu vào đủ tiêu chuẩn có vai trò quyết định kết quả xét nghiệm.